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    芽孢菌的分離培養(yǎng)

    2017-04-19  來自: 鶴壁市百惠生物科技有限公司 瀏覽次數(shù):2103

    芽孢菌參與許多有機物的轉(zhuǎn)化及生物降解,多數(shù)為好氧或兼性厭氧微生物,菌體桿狀或球狀。芽孢是在菌體內(nèi)形成的圓形或橢圓形的內(nèi)生孢子。芽孢的代謝活力弱,對不良環(huán)境如高溫、干燥、化學(xué)藥品等的抵抗力強。
    分離步驟如下:
    (1)將水樣接種于刺激芽孢生長的培養(yǎng)基中,35℃培養(yǎng)18~24小時。將培養(yǎng)好的菌懸液置于80℃水浴中加熱10~20分鐘以殺死不能形成芽孢的菌體。
    刺激芽孢生長的培養(yǎng)基如下:
    蛋白胨 10g KH2PO4 1.5g
    酵母膏 3g Na2HPO4 2 g
    淀粉 3g H2O 1000 ml
    MgSO4·7H2O 0.1g pH7.8
    121℃, 15分鐘
    (2)將加熱處理過的菌懸液稀釋為10-3、10-4、10-5,分別取0.5mL接入無菌平板,倒入芽孢菌分離培養(yǎng)基,混勻,置于35℃,培養(yǎng)18~24小時。
    芽孢菌分離培養(yǎng)基如下:
    用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與70Bx麥芽汁培養(yǎng)基,溶化后以1:1的量混勻即成.
    營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配方為:
    肉膏 3~5g NaCl 5 g
    蛋白胨 10 g 瓊脂 15~20g
    H2O 1000ml pH 7.0~7.2
    121℃,20分鐘
    (3)挑取單菌落作分離純化培養(yǎng):
    單菌落→液體培養(yǎng)基→菌懸液→劃線分離,經(jīng)數(shù)次重復(fù),直至由單個細胞形成單獨的菌落。

    關(guān)鍵詞: 芽孢菌的分離培養(yǎng)

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